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阻断剂
作者:keybiotech    发布于:2019-04-07 23:16:04    文字:【】【】【

内源性干扰是免疫检测中使用的试剂抗体与病人样本中的内源性物质发生交叉反应所致,添加阻断剂能消除或者降低免疫分析中的内源性干扰,提高试剂盒检测系统的灵敏度与精密度

阻断剂主要用于双抗体夹心法、竞争抑制法、IgM检测、免疫比浊、化学发光、胶体金侧向层析等。单克隆抗体

 1.类风湿因子(rheumatoid factor, RF)

l 以变性IgG为靶抗原的自身抗体

l IgM、IgA、IgG、IgD、IgE五型,68%-80%为IgM型

l 与天然IgG结合能力较差,易于人和动物的变性IgG或免疫复合物中的IgG结合

l 异嗜性抗体干扰的程度、频率与其浓度、亲和力以l 干扰产生具有随机性,与RF浓度无关

2.异嗜性抗体(Heterophil antibody, HA)

l 人外周循环血中存在的抗不明确抗原的抗体,通常是多特异性、亲和力较弱的抗体。

及检测系统有关

3.人抗动物抗体(Human anti Animal Antibody, HAAA)

l 具有抗动物蛋白活性的抗体,由医源性与非医源性引起。最常见的是人抗小鼠抗体(HAMA)

l 不同物种的HAAA相互之间有交叉

l 针对抗原明确,较强亲和力

 

免疫阻断剂主要分为以下几类:

被动阻断剂,一般为正常动物血清或正常动物IgG,其工作原理为通过高浓度添加,使干扰抗体优先与阻断剂结合而不与检测抗体或捕获抗体结合,从而降低干扰。通常,被动阻断剂只会封闭一种干扰抗体的活性,并且其效果取决于干扰抗体的亲和力。

主动阻断剂,一类对干扰抗体具有高亲和力的试剂。与干扰抗体结合后,可以通过位阻效应阻断干扰抗体与检测抗体或捕获抗体的结合。主动阻断剂优于被动阻断剂在于其只需要低浓度,即可实现高效阻断,避免阻断剂对正常检测过程的影响。

IgM检测专用阻断剂,检测之前用于去除人血清样本中RF因子和IgG,显著提高IgM检测的灵敏度和特异性。

 

好的阻断剂具备:

l 必须能够纠正任何样本中的干扰,不管干扰是种属特异性抗体还是类风湿因子造成的

l 必须是低浓度,高效能的,不会压本来的阳性样本的值

l 不应影响真阳性样本的 稀释线性

l 必须有很好的重复性,无批间差

l 必须长期稳定

l 必须经济实用

l 必须简单易用,可直接添加到免疫试剂中,无需额外试剂或样本处理步骤


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